BRCA1 ve BRCA2 Hücre Hatları

BRCA1 ve BRCA2 Hücre Hatları

BRCA1 HÜCRE HATLARI

Meme kanseri hücre hatları, farklı fenotipik ilişkileri olan hastalıkların bir panelini kapsayan meme kanseri modellemesi için yaygın olarak kullanılmaktadır. Hücre çizgileri, tümör çalışmaları için sınırsız homojen materyaller sağlasa ve kültürleri göreceli olarak kolay olsa da, ilk tesis sırasında ve sonraki ekim sırasında mutasyonları biriktirdikleri bilinmektedir. Bu nedenle, meme kanseri hücre çizgisi heterojenitesinin karsinomu yansıtıp yansıtmadığı, hücre çizgileri kullanılarak tümör seviyesinde güvenilir bir sonuç çıkarmadan önce çözülmesi gereken önemli bir sorun olmaya devam etmektedir. Meme kanseri hücre çizgisi alt tiplemesi için kullanılan tutarsız adlandırmalar ve hücre çizgileri ve tümörler için gruplandırılmış farklı alt tip tipleri doğrudan eşleşmelerini zorlaştırır. 92 meme kanseri hücre hattının moleküler özelliklerini farklı literatürlerde belgelendiği şekilde analiz ederek 84 hücre hattını meme tümörü sınıflamasına uygun olacak şekilde 5 gruba ayırıyoruz. Bu hücre çizgilerini taradıktan sonra, genetik olarak ve epigenetik olarak her bir alt tipin moleküler özelliklerini ve alt tipleme hakkında açık bilgi içermeyen 10 hücre hattını manuel olarak özetledik. Farklı çalışmalardan elde edilen primer moleküler özelliklerinde tutarsız bulunan veya orijinale kontamine olmuş dokuz hücre dizisi, deneysel kullanım için ilk seçenek olarak önerilmemiştir. Meme tümörü hücre çizgilerinin, birçok belirsizliğe sahip yüksek bir mutasyon frekansına sahip olmasına ve meme kanseri heterojenitesini tam olarak yakalayamamasına rağmen, aynı alt tipteki tümörler için uygulanabilir modellerdir. Zenginleştirilmiş interferon düzenlenmiş genlere sahip yeni hücre çizgileri, tümör heterojenitesi üzerindeki hücre çizgilerinin kapsamını genişletmek için oluşturulmalıdır. Meme karsinomları hakkındaki mevcut bilginin büyük bir kısmı, basit fakat standart ortam ve yaklaşımları kullanarak sınırsız bir homojen kendi kendini kopyalayan materyal kaynağı sağlayabildiklerinden, meme kanseri hücre hatları kullanılarak yapılan in vivo ve in vitro çalışmalardan elde edilir. Meme kanseri hücre çizgilerinin büyük oranda meme kanserini temsil ettiği sonucuna varılmış olsa da, ER ve HER2 sınıflaması için önemli tabakalayıcı maddeler olduğu halde, sürekli kanıtlar, ilk hücre hattı kuruluşu ve sonrasında seri geçiş sırasında çarpıcı genetik ve epigenetik değişiklikler önerdi, Sonuçta ortaya çıkan hücre çizgilerinin primer tümörlerden önemli ölçüde geliştiğini ileri sürmektediR. Ayrıca, farklı araştırmalar meme kanseri hücre çizgilerini farklı gruplarda sınıflandırmakta, bu da hücre çizgisi sınıflandırma konusundaki anlayışımızı ve tümörlerle alaka düzeyini zorlaştırmaktadır. Örneğin, Birnbaum ve diğ. 27 meme kanseri hücre hattını lümen, bazal ve mezenkimal alt tiplere ayırmış; Riaz ve diğ. karakterize edilen 5 alt tip, i. e. Perou  tarafından tanımlanan bir 496 gen panelini kullanarak, luminal, luminal-HER2 +, ER-negatif-HER2 +, bazal, normal benzeri, 51 meme kanseri hücre dizisi arasında; Lehmann ve diğ. alt bölünmüş üçlü negatif hücre hatları, bazal benzeri 1 (BL1), bazal benzeri 2 (BL2), immünomodülatör (IM), mezenkimal (M), mezenkimal kök benzeri (MSL), lüminal ve androjen reseptörü (LAR) olarak 7 kategoriye ayrılır. ve kararsız (UNS); ve bazı çalışmalar, meme kanseri hücre çizgilerini lümen benzeri ve bazal benzeri olarak ayırt eder; bazal sınıfı ayrıca bazal-A ve bazal-B’ye ayrılmıştır. Farklı literatürlerde tutarsız isimlendirme, sınıflandırma ve hatta çelişkili moleküler karakterizasyon göz önüne alındığında, sistematik özellik belgelendirmesine sahip olmayan hücre hatları ve tutarlı alt tiplendirme ile boğulmuş durumdayız. Öte yandan, meme kanseri çalışmaları için yaygın olarak kullanılan hücre çizgileri sayısı, MCF7, T47D ve MDAMB231 gibi hücre çizgileri ile ilişkili çalışmalarda kullanılan hücre çizgilerinin üçte ikisinden fazlasını oluşturan oldukça küçüktür. Bu, bu birkaç hücre hattının, farklı klinik sonuçlara sahip geniş bir yelpazedeki meme tümörlerinin ne kadar temsili olduğu sorusunu gündeme getirmektedir. Bu nedenle moleküler özellikleri ve her hücre hattının temsil ettiği ilgili tümör alt tipini ayırmak için motive oluruz ve uygun hücre hatlarını kullanarak meme kanseri modellemeyi kolaylaştırır.

İlk meme kanseri hücre hattının kurulmasından bu yana, BT-20, 1958’de, yaşayabilir tümör hücrelerinin çevresindeki stromadan ve tıkanıklıktan çıkarılmasındaki teknik zorluklar nedeniyle nispeten az sayıda hücre çizgisi elde edildi. Ekim sırasında uzun süreli yayılımın. Çoğu hücre hattı 1970’lerin sonunda kuruldu.

Hücre hattı isimlendirmesi, genel olarak, fenotipik ilişkisini yansıtmaz, bunun yerine nasıl kurulduğunu, e. g. aynı laboratuvardan, aynı hastadan türetilmiş olup, aynı başlangıç ​​popülasyonundan seri alt kültürle izole edilmiş veya aynı yaklaşım kullanılarak kültürlenmiş. Örneğin, ‘HCC serisi’ hücre hatları, adlarıyla temsil edildiği gibi Hamon Kanser Merkezinde izole edilmiştir; ‘MDA serisi’, M. D. Anderson Hastanesi ve Tümör Enstitüsünden kuruldu; Farklı fenotipleri ve genotiplerine rağmen, infiltrasyon ve duktal meme karsinomu tanısı alan aynı hastadan ’21 serisi ‘oluşturulmuştur. ‘HMT serisi’, tesislerinde P53 mutasyonu, MYC amplifikasyonu, çıplak farelerde tümörijenikliğin eşlik ettiği EGF bağımsızlığı, ekspresyon üzerindeki EGF bağımsızlığı dahil olmak üzere çeşitli koşullar altında art arda subktivasyona tabi tutuldu. ‘SUM serisi’, farklı tümör örneklerinden izole edilmiş olmasına rağmen, aynı seçici ortam kullanılarak kurulmuştur. Hücre hatları tipik olarak onları türeten bilim adamı tarafından adlandırıldığından, her hücre hattının özellikle herhangi bir diziye ait olmayanlara nasıl adlandırıldığına dair bir kural yoktur. Yakın zamana kadar yeni kurulan hücre hatlarının isimlendirilmesinin düzenli hale getirilmesine ve sonuçta hücre hattı ek açıklamalarının ve bilimsel yeniden üretilebilirliğin artmasına yardımcı olan hücre hattı adlandırması üzerinde standardizasyon önerilmiştir.

Meme kanseri hücre hatlarının moleküler sınıflandırılması

Gen ekspresyonu profili, meme kanseri hücre hatlarını kataloglamak için geniş çapta uygulanmıştır ve çeşitli kümeler çeşitli şemalarla eşleştirilmiştir. Meme kanseri alt tiplemesi için geleneksel olarak kullanılan üç önemli reseptörün durumuna göre 84 hücre çizgisini karakterize ettik, i. e. östrojen reseptörü (ER), progesteron reseptörü (PR) ve insan epitel reseptörü 2 (HER2) ve bunları aynı nomenklatürü kullanarak sınıflandırır, i. e. lümen A, lümen B, HER2 pozitif ve üçlü negatif alt tipler; üçlü negatif hücreler ayrıca, heterojenliğini yakalamak ve yaygın olarak kullanılan isimlere kolay bir bağlantı sağlamak için A ve B’ye bölünür; e. , bazal A ve B.

Her ne kadar birçok çalışmada lümen hücre çizgileri doku örnekleri olarak HER2 durumlarına göre A ve B alt tiplerine daha fazla ayrılmamasına rağmen, birkaç raporda, MDAMB330 gibi ER + HER2 + hücre çizgileri luminal-ERBB2 + alt tipi olarak sınıflandırılmıştır. Bununla birlikte, luminal-ERBB2 + hücre hatlarının çoğunluğu, e. g. HCC202, SKBR3, UACC893, SUM190PT, SUM225CWN, HER2 pozitif tümör hastalarına karşılık gelen moleküler seviyede ER-HER2 + ‘dır. Bu hücre hatlarından bazıları lümen (HCC202, SKBR3, UACC893) olarak adlandırılırken, bazıları bazal veya bazal A (SUM190PT, SUM225CWN). HER2 + hücre çizgileri, dikkate değer örtüşmelerine rağmen, farklı ad isimleri yelpazesine sahiptir. g. , luminal (AU565, HCC2218, OCUB-F, SKBR5, HCC202, SKBR3, UACC893), lüminal-HRBB2 + (HCC202, SKBR3, UACC893, SUM190PT, SUM225CWN) [1 ER + 2 + (HCC1008, HCC1569, HCC1954) ve bazal A (SUM190PT, SUM225CWN, HCC1008, HCC1569, HCC1954). ER, PR ve HER2’nin üçlü negatif statüsüne sahip hücre çizgileri, çoğu literatürde bazal A ve bazal B hücre çizgileri olarak ayırt edilir, bazal A, daha lümen benzeri ve bazal B daha bazal benzeridir. Farklı literatürlerden hücre dizisi alt tipleme adlandırmalarını en sık kullanılan meme kanseri sınıflandırma yapısına eşleştirdik ve her alt tipin moleküler özelliklerini ve morfolojik özelliklerini özetledik. Aşağıda detayları verilmiştir.

Tablo 1: 84 meme kanseri hücre hattının sınıflandırılması, moleküler bilgileri ve kültür koşulları ve türev oldukları tümörlerin klinik özellikleri

Cell linesERPRHER2BRCA1
Mutation
SubtypeSeriesBasic MediumTumorSource
BT483++/-WTLABTRPMIIDCL
CAMA1++/-WTLANADMEMACL
EFM19++NDLAEFMRPMIIDCL
HCC1428++NDLAHCCRPMIACL
HCC712++/-NDLAHCCRPMIDCL
IBEP2+NDLANADMEMIDCL
KPL1+NDLANARPMIIDCL
LY2+NDLANADMEMIDCL
MCF7++WTLAMCFRPMI, DMEMIDCL
MDAMB134+NDLAMDARPMIIDCL
MDAMB134VI+WTLAMDADMEMIDCL
MDAMB175+NDLAMDARPMIIDCL
MDAMB175VII+WTLAMDADMEMIDCL
MDAMB415++/-WTLAMDADMEMACL
T47D++WTLANARPMIIDCL
ZR751++/-WTLAZR75RPMIIDCL
ZR75B+NDLAZR75RPMINAL
BSMZ+++NDLBNARPMIIDCL
BT474+++WTLBBTRPMIIDCL
EFM192A+++NDLBEFMRPMIACL
IBEP1++NDLBIBEPDMEMIDCL
IBEP3++NDLBIBEPDMEMIDCL
MDAMB330++WTLBMDARPMIILCL
MDAMB361++/-+WTLBMDARPMI, DMEMACL
UACC812++/-+WTLBUACCRPMI, DMEMIDCL
ZR7527++WTLBZR75RPMIIDCL
ZR7530++WTLBZR75RPMIIDCL
21MT1+/-+NDH21α-MEM/DFC1IDCL
21MT2+/-+NDH21α-MEM/DFC1IDCL
21NT+/-+NDH21α-MEM/DFC1IDCL
21PT+/-+NDH21α-MEM/DFC1IDCL
AU565+WTHNARPMIACL
HCC1008+NDHHCCRPMIIDCL
HCC1569+WTHHCCRPMIMCL
HCC1954+WTHHCCRPMIDCL
HCC202+WTHHCCRPMIDCL
HCC2218+NDHHCCRPMIDCL
HH315+NDHHHRPMICL
HH375+NDHHHRPMICL
KPL-4+WTHKPLDMEMIDCL
MDAMB453+WTHMDARPMI, DMEMACL
OCUB-F+WTHNARPMINAL
SKBR3+WTHSKBRRPMI, McCoysACL
SKBR5+WTHSKBRRPMIACL
SUM190PT+WTHSUMHam’s F12InfL
SUM225CWN+WTHSUMHam’s F12IDCL
UACC893+WTHUACCRPMIIDCL
BT20WTTNABTRPMI, DMEMIDCL
CAL148WTTNACALDMEMACD
DU4475WTTNANARPMIIDCD
EMG3NDTNANADMEMIDCL
HCC1143NDTNAHCCRPMIDCL
HCC1187NDTNAHCCRPMIDCL
HCC1599NDTNAHCCRPMIDCL
HCC1806NDTNAHCCRPMISqCL
HCC1937MUTNAHCCRPMIDCL
HCC2157NDTNAHCCRPMIDCL
HCC3153MUTNAHCCRPMIDCL
HCC70WTTNAHCCRPMIDCL
HMT3522WTTNAHMTDMEM, F12BL
KPL-3CNDTNAKPLRPMIIDCD
MA11NDTNANADMEMILCD
MDAMB435WTTNAMDADMEMACL
MDAMB436MUTNAMDARPMI, L15ACL
MDAMB468WTTNAMDARPMI, L15ACL
MFM223WTTNANAMEMCD
SUM185PEWTTNASUMHam’s F12DCL
SUM229PEWTTNASUMRPMIDCL
BT549WTTNBBTRPMIIDCL
CAL120WTTNBCALDMEMACD
CAL51WTTNBCALDMEMACD
CAL851WTTNBCALDMEMACD
HCC1395NDTNBHCCRPMIDCL
HCC1739NDTNBHCCRPMIDCD
HCC38NDTNBHCCRPMIDCL
HDQ-P1MUTNBNADMEMIDCD
Hs578TWTTNBNARPMI, DMEMIDCL
MDAMB157WTTNBMDARPMI, DMEMMCL
MDAMB231WTTNBMDARPMI, DMEMACL
SKBR7WTTNBSKBRRPMIACL
SUM102PTWTTNBSUMHam’s F12IDCL
SUM1315M02MUTNBSUMHam’s F12IDCL
SUM149PTMUTNBSUMHam’s F12InfDCL
SUM159PTWTTNBSUMHam’s F12AnCL

ER, PR ve HER2’deki durum, meme kanseri hücre hattı alt tiplemesinde kullanılan birincil özelliklerdir. BRCA1 mutasyon durumu, sporadik çekirdek bazal tümör modellemesi kolaylığı için açıklamalıdır; burada MU, ‘BRCA1 mutasyonu’ olan hücre hatlarını temsil eder, WT, ‘vahşi tip’ anlamına gelir ve ND, ‘karar verilmemiş’ için kısadır. Bu hücre hatlarını, literatürdeki alt yazı önerileri (L) veya türetilmiş bilgilere göre luminal A (LA), lümen B (LB), HER2 pozitif (H), Üçlü negatif A (TNA) ve Üçlü negatif B (TNB) olarak kategorize ediyoruz. kuruldukları orijinal makaleden (D). Bu bilgiler, ‘Referanslar’ sütununda listelenen referanslarla sırasıyla ‘Alt’ ve ‘Kaynak’ sütunlarında verilmektedir. ‘Seri’ sütunu, her hücre hattının hangi hücre hattı serisinden geldiğini ve bunlardan geleneksel olarak kurucu tarafından verilen ve temsil ettiği; g. hücre çizgisinin oluşturulduğu yer. ‘Temel Ortam’, diğer elemanların eklenmesine ihtiyaç duyabilecek ve diğer ortamların fizibilitesini ortadan kaldırmayan her hücre hattının yetiştirilmesi için ortak veya önerilen ortamı gösterir. ‘Tümör’ sütunu, aşağıdaki sembolik gösterimlerle hücre çizgilerinin türetildiği tümörün klinik özelliğini gösterir; e.g , AC ‘adenokarsinom’, AnC ‘anaplastik karsinom’, B ‘iyi huylu tümör’, C ‘karsinom’, CS ‘karsinosarkom’, DC ‘duktal karsinom’, IDC ‘invaziv duktal karsinom’, ILC; ‘invaziv lobüler karsinom’, InfC ‘enflamatuar karsinom’, InfDC ‘enflamatuar duktal karsinom’, MC ‘medüller karsinom’, SqC ‘skuamöz karsinom’ ve NA bu bilgilerin bulunmadığı anlamına gelir. 

Meme kanseri hücre dizisi alt tiplerinin moleküler ve morfolojik özellikleri. Her bir meme kanseri hücre çizgisi alt tipinin tanımlanmasında kullanılan mRNA’ların, miRNA’ların ve protein markörlerinin panelleri ve bunların morfolojik farklılıkları özetlenmiştir. Üçlü negatif hücre çizgilerinde, A ve B alt hatları arasında paylaşılan belirteçler mRNA ve protein sütunlarında ayrı olarak sunulur.

Meme kanserinde, çeşitli kombinasyonlarda değiştirilmiş ekspresyon paternleri olan şu an bilinen onkogenlerin tümü, SUM göğüs kanseri hücre dizilerinde temsil edilir ve karakterize edilir. Ayrıca, bu hücre çizgileri izolasyon ve büyüme koşullarını, Affymetrix GeneChip’ler yoluyla gen ekspresyon verilerini ve östrojen reseptörü ve Her2 durumu gibi biyomoleküler markörleri tarif eden 50’den fazla hakemli yayında tarif edilmiştir.

Meme kanseri, karmaşık ve heterojen bir hastalıktır. Gen ekspresyonu profillemesi, bu heterojenliği moleküler düzeyde anlamamıza, histolojik tip, tümör derecesi, lenf nodu durumu ve östrojen reseptörü ve insan epidermal büyüme faktörü reseptörü 2 gibi öngörücü markörlerin varlığı gibi basit önlemlere dayalı taksonomiyi rafine etmemize önemli ölçüde katkıda bulunmuştur. (HER2), lümen A, lümen B, bazal benzeri, HER2-pozitif ve normal alt grupları içeren daha sofistike bir sınıflandırmaya. Laboratuvarda meme kanseri genellikle yerleşik hücre hatları kullanılarak modellenir. Bu derlemede, bu gözden geçirilmiş klinik sınıflandırmalar ışığında, meme kanseri hücre hatlarının deneysel model olarak kullanımını çevreleyen bazı konuları tartışıyoruz ve translasyonel meme kanseri araştırmalarında kullanımlarını iyileştirmek için önerilerde bulunduk.

İlk insan hücre hattı, 50 yıldan fazla bir zaman önce bir Baltimore laboratuarında George Gey tarafından kurulmuştur. Bu hücre çizgisi HeLa idi – hücre hattının türetildiği, servikal karsinoması olan Henrietta Lacks adını aldı. Gey’nin vizyonu, bugün bildiğimiz hücre kültürünün önünü açarak kanser araştırmalarında yaygın bir şekilde gelişmesine olanak tanıdı. Kanser araştırmalarında kültürlü hücre hatları kullanmanın en büyük yararlarından biri, standart hücre kültürü ortamında kendi kendini çoğaltma yeteneğine sahip nispeten homojen bir hücre popülasyonunun sonsuz bir arzını sunmalarıdır.

Kurulacak ilk meme kanseri hücre dizisi 1958’de BT-20 idi. Bununla birlikte, 20 yıl sonra, MD Anderson serileri dahil olmak üzere meme kanseri hücre dizilerinin yaygınlaşması ve dünyada hala en yaygın kullanılan meme kanseri hücre çizgisi olan MCF-7, 1973’de kurulan Michigan Kanser Vakfı. MCF-7’nin popülaritesi büyük ölçüde östrojen reseptörü (ER) ekspresyonu yoluyla enfes hormon duyarlılığı nedeniyledir ve hormon cevabını incelemek için ideal bir modeldir.

Bu erken başarılara rağmen, yakın geçmişte, özellikle önemli stromal kontaminasyon olmadan homojen popülasyonların kültürlenmesindeki zorluklardan ve en azından Birleşik Krallık’ta kısmen insan edinmeyi çevreleyen sıkı etik düzenlemelerden dolayı zorluklar nedeniyle nispeten az sayıda meme kanseri hücre hattı kurulmuştur. Başarılar, bireysel hastalarda meme primer tümörlerinden, plevral efüzyonlardan veya çeşitli metastatik bölgelerden türetilen 10 hücre hattının SUM serisini içerir. Bu hücre çizgileri şimdi ticari hücre bankaları vasıtasıyla yaygın şekilde temin edilebilir.

Her ne kadar moleküler alt grupları yansıtmak için makul sayıda meme kanseri hücre hattı mevcut olsa da, ilgili modellerde nadir görülen histopatolojik tiplerin bazıları için eksiklikler bulunmaktadır. Phyllodes tümörlerinden iki hücre hattının gelişimi hakkında tek bir rapor vardır, ancak bunlar yaygın kullanım kazanmış gibi görünmemektedir. İnflamatuar meme kanserinden türetilen hücre çizgileri SUM149 ve SUM190 ile sınırlıdır, ancak bu gruptaki bazal fenotipin prevalansı bazal hücre çizgilerinin vekil olarak kullanılabileceğini göstermektedir. Bildiğimiz kadarıyla, erkek meme kanserinden türetilen bilinen bir hücre çizgisi yoktur ve erkek meme kanseri insidansının yükselmesi göz önüne alındığında, bu, fonksiyonel anlamda modelleme için bir zorluk teşkil etmektedir.

Meme kanseri biyolojisi hakkındaki anlayışımızdaki büyük ilerlemeler, son birkaç on yılda meme kanseri hücre hatları kullanılarak yapılmıştır. Şimdi, ” tek marker, bir hücre çizgisi ” geçmişinin çalışmalarının ötesine geçmeliyiz ve genetik ve transkriptomik profilleme yoluyla edinilen bilgileri hücre çizgilerini veya hücre çizgisi panellerini, meme kanseri spesifik alt gruplarını incelemek için deneysel modeller olarak daha etkili kullanmak için kullanmalıyız. Meme kanseri hastaları için sonucun iyileştirilmesinde en büyük etkiye sahip olması muhtemeldir.

CSC: kanser kök hücresi

ER: östrojen reseptörü

HER2: insan epidermal büyüme faktörü reseptörü 2

MEK: mitojenle aktifleştirilen protein / hücre dışı sinyal düzenlenmiş kinaz kinaz

PR: progesteron reseptörü.

Tablo 2: Hücre hattı örnekleri.

SUM1315MO2

SUM1315MO2 hücre hattı, invaziv infiltrasyonlu duktal karsinoması olan bir hastanın ksenogreftlenmiş metastatik nodülünden geliştirilmiştir. Hücre hattı ölümsüz, ER negatif, PR negatif ve yüksek seviyede Her2 ve EGF reseptörleri ifade eder. SUM1315M02’nin çıplak farelerde akciğer ve kemik metastazı oluşturduğu gösterilmiştir.

MDA MB436

Çizgi pleomorfiktir ve çoğu hücre, dolaylı immünofloresan boyama ile gösterildiği gibi anti-tubulin antikoru ile yoğun şekilde reaksiyona girer. Mda mb 436 morfolojik olarak çok çekirdekli bileşen hücrelere sahiptir.

SUM149PT

SUM149PT hücre hattı, ER negatif, PR negatif ve Her2 pozitif (aktive edilmemiş) enflamatuar meme kanseri olan bir hastanın İnvaziv Ductal Karsinomundan geliştirilmiştir. Hücre hattı ölümsüzdür ve lümen meme epitel hücrelerinin kökenleri ile tutarlı olan luminal sitokeratin 8, 18 ve 19’u ifade eder. SUM149PT’nin çıplak farelerde tümör oluşturduğu bilinmektedir.

MCF10A

MCF 10A hücre çizgisi, tümörijenik olmayan bir epitel hücre çizgisidir. Hücreler epitelyal sialomusinler, sitokeratinler ve süt yağı globül antijeni için pozitiftir. Kolajende üç boyutlu büyüme gösterirler ve birleşik kültürlerde kubbeler oluştururlar. Şimdiye kadar, hücreler hiçbir terminal farklılaşması veya yaşlanma belirtisi göstermedi. Çizgi insülin, glukokortikoidler, kolera enterotoksin ve epidermal büyüme faktörüne (EGF) duyarlıdır. Elektron mikroskobu ile hücreler, lüminal duktal hücrelerin özelliklerini gösterir, ancak miyoepitel hücrelerinin değil. Ayrıca MFA-Meme ve MC-5 monoklonal antikorları ile pozitif reaksiyon ile tespit edilen memeye özgü antijenleri eksprese ederler. Ortamın kalsiyum içeriği, hücrelerin morfolojisi üzerinde güçlü bir etkiye sahiptir.

MCF7

MCF7 çizgisi, sitoplazmik östrojen reseptörleri yoluyla östradiolü işleme kabiliyeti ve kubbeleri oluşturma kabiliyeti dahil olmak üzere farklılaştırılmış meme epitelinin çeşitli özelliklerini korur. Hücreler WNT7B onkogenini eksprese eder. MCF7 hücrelerinin büyümesi, tümör nekroz faktörü alfa (TNF alfa) tarafından inhibe edilir. IGFBP’lerin salgılanması, anti-östrojenlerle yapılan tedavi ile modüle edilebilir.

HCC1937 

HCC1937 (CRL-2336), kromozom sayısından ve karyotip tanımından açıkça anlaşılan yüksek oranda dönüştürülmüştür. Modal kromozom sayısı 100’dür. Neredeyse her kromozomu içeren en az kırk üç markör kromozom bulunur. Kromozom 1 ve kromozom 3 türevi kromozomları, ticari bütün kromozom boya (floresan yerinde hibridizasyon (FISH)) probları kullanılarak doğrulandı. Qter’de ekstra bir C-bandına sahip olan bir akrosantrik kromozom tespit edildi. Normal X kromozomu yoktu, ancak her hücrede en az bir türev X görüldü. Bir Y kromozomunun yokluğu, QM boyaması ve C-bantları ile doğrulandı. N1, N4, N15, N16 ve N18’in normal kopyaları yoktu. İstek üzerine daha ayrıntılı sitogenetik bilgi sağlanır. BRCA1 analizi, hücre hattının BRCA1 5382C mutasyonu için homozigot olduğunu, aynı hastadan türetilen lenfoblastoid hücre hattının aynı mutasyon için heterozigot olduğunu ortaya koydu. Hücre çizgisi, vahşi tip alel kaybıyla birlikte edinilmiş bir TP53 mutasyonuna sahiptir; PTEN geninin edinilmiş bir homozigos silinmesi ve meme kanserinin patogenezinde rol aldığı bilinen birçok lokasyonda heterozigotluk kaybı vardır. Hücreler Her2-neu ekspresyonu ve p53 ekspresyonu için negatiftir. HCC1937, epitel hücresine özgü marker Epitel Glikoproteini 2 (EGP2) ve sitokeratin 19 için pozitiftir. Hücreler östrojen reseptörü (ER) ve progesteron reseptörü (PR) ekspresyonu için negatiftir.

REFERANSLAR

  1. Riaz M, van Jaarsveld MT, Hollestelle A, Prager-van der Smissen WJ, Heine AA, Boersma AW. et al. miRNA expression profiling of 51 human breast cancer cell lines reveals subtype and driver mutation-specific miRNAs. Breast cancer research: BCR. 2013;15:R33
  2. Lacroix M, Haibe-Kains B, Hennuy B, Laes JF, Lallemand F, Gonze I. et al. Gene regulation by phorbol 12-myristate 13-acetate in MCF-7 and MDA-MB-231, two breast cancer cell lines exhibiting highly different phenotypes. Oncology reports. 2004;12:701-7
  3. Cope LM, Fackler MJ, Lopez-Bujanda Z, Wolff AC, Visvanathan K, Gray JW. et al. Do breast cancer cell lines provide a relevant model of the patient tumor methylome?. PloS one. 2014;9:e105545
  4. Elstrodt F, Hollestelle A, Nagel JH, Gorin M, Wasielewski M, van den Ouweland A. et al. BRCA1 mutation analysis of 41 human breast cancer cell lines reveals three new deleterious mutants. Cancer research. 2006;66:41-5
  5. Neve RM, Chin K, Fridlyand J, Yeh J, Baehner FL, Fevr T. et al. A collection of breast cancer cell lines for the study of functionally distinct cancer subtypes. Cancer cell. 2006;10:515-27
  6. Hollestelle A, Nagel JH, Smid M, Lam S, Elstrodt F, Wasielewski M. et al. Distinct gene mutation profiles among luminal-type and basal-type breast cancer cell lines. Breast cancer research and treatment. 2010;121:53-64
  7. Charafe-Jauffret E, Ginestier C, Monville F, Finetti P, Adelaide J, Cervera N. et al. Gene expression profiling of breast cell lines identifies potential new basal markers. Oncogene. 2006;25:2273-84
  8. Kao J, Salari K, Bocanegra M, Choi YL, Girard L, Gandhi J. et al. Molecular profiling of breast cancer cell lines defines relevant tumor models and provides a resource for cancer gene discovery. PloS one. 2009;4:e6146
  9. Lehmann BD, Bauer JA, Chen X, Sanders ME, Chakravarthy AB, Shyr Y. et al. Identification of human triple-negative breast cancer subtypes and preclinical models for selection of targeted therapies. The Journal of clinical investigation. 2011;121:2750-67
  10. Lacroix M, Leclercq G. Relevance of breast cancer cell lines as models for breast tumours: an update. Breast cancer research and treatment. 2004;83:249-89
  11. Lasfargues EY, Ozzello L. Cultivation of human breast carcinomas. Journal of the National Cancer Institute. 1958;21:1131-47
  12. Gazdar AF, Kurvari V, Virmani A, Gollahon L, Sakaguchi M, Westerfield M. et al. Characterization of paired tumor and non-tumor cell lines established from patients with breast cancer. International journal of cancer. 1998;78:766-74
  13. Amadori D, Bertoni L, Flamigni A, Savini S, De Giovanni C, Casanova S. et al. Establishment and characterization of a new cell line from primary human breast carcinoma. Breast cancer research and treatment. 1993;28:251-60
  14. Cailleau R, Olive M, Cruciger QV. Long-term human breast carcinoma cell lines of metastatic origin: preliminary characterization. In vitro. 1978;14:911-5
  15. Band V, Zajchowski D, Swisshelm K, Trask D, Kulesa V, Cohen C. et al. Tumor progression in four mammary epithelial cell lines derived from the same patient. Cancer research. 1990;50:7351-7
  16. Ethier SP, Mahacek ML, Gullick WJ, Frank TS, Weber BL. Differential isolation of normal luminal mammary epithelial cells and breast cancer cells from primary and metastatic sites using selective media. Cancer research. 1993;53:627-35
  17. Committee ICLA. Naming a Cell Line. http://iclac
  18. Yu M, Selvaraj SK, Liang-Chu MM, Aghajani S, Busse M, Yuan J. et al. A resource for cell line authentication, annotation and quality control. Nature. 2015;520:307-11
  19. Watanabe M, Tanaka H, Kamada M, Okano JH, Takahashi H, Uchida K. et al. Establishment of the Human BSMZ Breast Cancer Cell Line, Which Overexpresses the erbB-2 and c-myc Genes. Cancer research. 1992;52:5178-82
  20. Alan S, Fadi W A, John M, Nancy F, Pingfu F, Hannah G. et al. MUC1 is expressed at high frequency in early-stage basal-like triple-negative breast cancer. Human pathology. 2013;44:2159-66
  21. https://www.proteinatlas.org/learn/cellines#hemapoetic
  22. https://web.expasy.org/cellosaurus/CVCL_3383
  23. https://www.lgcstandards-atcc.org/products/all/CRL-10317.aspx
  24. https://www.lgcstandards-atcc.org/products/all/HTB-22.aspx#characteristics
  25. https://physics.cancer.gov/docs/bioresource/breast/NCI-PBCF-CRL2336_HCC1937_v1.0_SOP-508.pdf
  26. https://cancerres.aacrjournals.org/content/58/15/3237.full-text.pdf
  27. https://www.nature.com/articles/6600859
  28. http://www.lgcstandards-atcc.org/products/all/CRL-2336.aspx?geo_country=tr#characteristics

Yazarlar;

Halil İbrahim Duman
Kahraman Küpçük
Beril Tufan
Zeynep Begüm Özman

Bir cevap yazın

E-posta hesabınız yayımlanmayacak. Gerekli alanlar * ile işaretlenmişlerdir